Kaj je PCR analiza?
Analiza verižne reakcije s polimerazo (PCR) je laboratorijska tehnika, katere namen je določiti majhne količine DNA v vzorcu s postopkom, znanim kot ojačenje . Med pomnoževanjem PCR se DNA zanimanja večkrat kopira, dokler ni dovolj za analizo in odkrivanje. Na primer, PCR se lahko uporablja za identifikacijo majhnih količin DNK iz organizmov, ki povzročajo gonorejo ali klamidijo, ki so prisotni v vzorcu urina .
Kako deluje PCR?
Prvi korak v PCR je ogrevanje vzorca, tako da se dvojno verižna DNA ločuje v dve enojni prameni - to se imenuje denaturacija . Nato se z vzorčnim DNK kombinirajo primerji , kratki vzorci DNA, ki se ujemajo s konci zaporedja zanimanja DNA. Po tem se za začetek DNA replikacije na lokaciji primera uporablja DNA polimeraza . Nazadnje, DNK segrejemo, da ločimo pramene še enkrat in celoten postopek PCR se začne znova.
Količina zanimivega segmenta DNA, prisotnega v vzorcu, eksponentno narašča z vsakim PCR-ciklusom: ena kopija postane dva, nato postane štiri, nato postane osem itd .; tako da je na splošno potrebno le 20 do 40 ciklov, da se ugotovi, ali je zadevna DNA prisotna (in, če je, zagotoviti zadosten vzorec za analizo).
Vsi koraki verižne reakcije s polimerazo - denaturacijo DNK, nanašanje pragov in podaljšanje DNK - se zgodijo pri različnih temperaturah, tako da je po začetni mešanici mogoče nadzorovati s procesom, imenovanim termocikliranje , v katerem se temperatura drži na potrebnih ravneh dovolj dolgo, da se izvede vsak korak.
Tako je PCR učinkovit način za povečanje količine ciljne DNK v eni sami epruveti, pri kateri ni potrebe po človekovem posegu.
Polimerazna verižna reakcija je predstavljala revolucijo v biološki tehniki, ko je bila prvič razvita v zgodnjih osemdesetih letih, ustvarjalec PCR-ja Kary Mullis pa je za svoje delo leta 1993 dobil Nobelovo nagrado za kemijo.
Zakaj je PCR pomemben za testiranje STD?
Polimerazna verižna reakcija in s tem povezane tehnike, kot je ligazna verižna reakcija , se izkazujejo za vse večji pomen pri testiranju STD. To je zato, ker lahko te tehnike v vzorcih neposredno identificirajo majhne količine virusne DNA ali RNK. Identifikacija genetske kode patogena ne zahteva, da je patogen živ - kot bakterijska kultura ali virusna kultura . Prav tako ne zahteva, da bi se okužba zgodila dovolj dolgo časa, da bi ljudje razvili zaznavno protitelesno reakcijo (kot je odkrit s pomočjo ELISA ). To pomeni, da lahko tehnike PCR včasih odkrijejo bolezni prej kot pri drugih testih in brez koliko je treba skrbeti za ohranjanje živih vzorcev ali testiranje ob pravem času.